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PEAQ-ITC

결합 매개 변수의 고감도 측정

MicroCal 기술인 PEAQ-ITC는 생체분자 상호작용의 용액 연구에서 라벨이 필요 없는 고감도, 저용량 등온 적정 열량계입니다. 단일 실험에서 결합 매개 변수를 직접 측정하고 최소 10µg의 시료만을 사용하여도 친화도가 약하거나 높은 결합제를 모두 분석할 수 있습니다. 반자동 유지보수는 작업자 간섭을 최소화하고 시스템을 완전 자동화된 PEAQ-ITC Automated로 업그레이드할 수 있으며, 이 시스템은 향후 많은 작업량을 처리해야 하고 처리 속도와 감도가 다른 무엇보다도 중요한 실험실에 적합합니다.

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개요

MicroCal PEAQ-ITC은 간편한 사용과 뛰어난 감도를 제공하도록 설계되었습니다. 이 시스템은 생화학적 결합 반응 동안 방출되거나 흡수된 열을 직접 측정하고 결합 친화도(KD), 화학량론(n), 엔탈피(ΔH) 및 엔트로피(ΔS)를 산출합니다. 최소한의 시료 준비로 시스템 최적화 데이터를 빠르고 쉽게 생성합니다. 친화도 범위가 넓으므로 탁월한 재현성을 바탕으로 약하거나 높은 친화도를 가진 결합제를 모두 분석할 수 있습니다. MicroCal ITC는 높은 민감성과 빠른 결과가 무엇보다 중요한 생체 분자 상호 작용을 연구하는 실험실에서 핵심적인 도구입니다.

  • 사용자 친화적 안내 작업 흐름과 내장된 도움말 비디오 덕분에 사용자의 수준에 상관없이 양질의 데이터를 생성할 수 있습니다.
  • 높은 신호 대 잡음비로 결과의 품질과 신뢰도를 높여 주며 도출된 친화도 및 열역학적 매개 변수 데이터의 신뢰도가 높습니다.
  • 시료 셀의 세척제 자동 세척 기능과 적정 실린지로 재현성이 높은 양질의 데이터를 얻을 수 있습니다.
  • 단일 실험의 결합 매개 변수(친화도, 화학량론, 엔탈피 및 엔트로피)
  • 분석 개발, 표지, 고정화, 분자량 제한 없이 첫 번째 결과를 빠르게 도출
  • 최소 10µg의 단백질을 사용하여 생체 분자 상호 작용을 조사하기 위한 감도
  • 나노몰 친화도(KDS)에 대한 밀리몰 직접 측정(10-2 - 10-9M).
  • 경쟁적 결합 기법을 사용하여 피코몰 해리 상수에 대한 나노몰 측정(10-9 ~ 10-12M).
  • 화학적 저항성과 생물학적 시료와의 호환성에 대한 비반응성 하스텔로이
  • 비수계 용매와 호환
  • 완전 자동화된 MicroCal PEAQ-ITC Automated로 업그레이드 가능

저분자, 단백질, 항체, 핵산, 지질 및 다른 생체 분자의 분자 상호 작용 분석을 포함하여 다양한 응용 분야를 MicroCal PEAQ-ITC로 조사할 수 있습니다. 또한 효소 반응 속도를 측정하는 데 사용할 수 있습니다. 

분석 소프트웨어

MicroCal PEAQ-ITC 분석 소프트웨어로 실험 디자인 시뮬레이션, 대규모 데이터 세트에 대한 배치 평가, 자동식 데이터 질 평가 등을 수행할 수 있으며, 사용자가 빠르고 쉽게 최종 결과물을 얻도록 효율화된 사용자 인터페이스 및 양질의 프리젠테이션 그래프를 이용할 수 있습니다.

  • 단일 세션에서 다수의 실험 시작하기
  • 다양한 자동 피팅 모델을 지원합니다
    • 분해.
    • 효소 반응 속도 - 다중 주입.
    • 효소 반응 속도 - 단일 주입.
    • 결합 부위 세트 하나.
    • 순차적 결합 부위.
    • 결합 부위 세트 하나 - SIM.
    • 결합 부위 세트 두 개.
    • 경쟁적.
  • 데이터 질 자동 평가.
    • 양질의 데이터 – 결합.
    • 양질의 데이터 - 비결합.
    • 불량 데이터 – 데이터 확인하기

작동 방법

등온 적정 미세 열량측정계는 두 분자가 상호 작용할 때 발생하는 열 변화를 측정합니다. 상호 작용하는 분자가 자유 상태에서 결합 상태로 전환되면 비공유 결합의 재배치 및 형성의 결과로 열이 흡수되거나 방출됩니다. ITC는 셀 가열기에 적용된 차동 전력을 측정하여 열 변화를 모니터링하고 결합 파트너가 혼합됨에 따라 기준 셀과 샘플 셀 간에 영의 온도차를 유지해야 합니다. 기준 셀은 대개 물을 포함하지만, 샘플 셀은 결합 매개 변수(샘플, 단, 생체 분자일 필요는 없음) 중 하나와 다른 결합 파트너(리간드)를 보유한 교반 주사기를 포함합니다 리간드 농도가 샘플 농도의 2 ~ 3배가 될 때까지 리간드는 보통 0.5 ~ 2μL 소량으로 샘플 셀에 주입합니다. 각 리간드 주입 시 열 펄스가 발생하고 시간에 따라 통합되며 농도에 대해 정규화됨에 따라 kcal/mol 대 분자비(리간드/샘플)의 적정 곡선이 생성됩니다. 등온선을 결합 모델에 맞추어 조정하고 친화도(KD), 화학량론(n) 및 상호 작용에 대한 엔탈피(ΔH)를 생성합니다.

MicroCal PEAQ ITC Microcalorimeters for microcalorimetry and label free analysis using isothermal titration calorimetry

MicroCal PEAQ ITC Microcalorimeters for microcalorimetry and label free analysis using isothermal titration calorimetry

사양

측정 유형 친화도(KD)
엔탈피 ∆H
엔트로피 ∆S
화학량론(n)
시료 용량 280 µL
셀 용량 200 µL
샘플 주입 주사기 용량 40 µL
샘플 주입량 결정 < 1%(2μL 기반)
샘플 처리량 하루 8시간당 0 ~ 12
셀 물질 하스텔로이
동전 모양
잡음(Noise) 0.15 ncal/s
온도 범위 2 °C ~ 80 °C
온도 안정성 ± 0.00012°C
반응 시간 8 s*
다중 피드백 모드 예(수동, 하이 게인, 로우 게인)
참고 *MicroCal PEAQ-ITC의 기기 반응 시간은 완벽히 일정합니다.  이 반응 시간은 베이스라인에서부터 첫 번째 편차와 63%의 최대 피크 높이인 피크 지점 간의 시간 간격입니다.

사용 환경

작동 온도 (°C) 10°C ~ 28°C
습도 0% ~ 70% RH(비응축)

전기 등급

전원 100 - 200 V, 50/60 Hz, 130 W
무게 13.6 kg
크기(W, D, H) 43 x 38 x 46 cm (열량측정계 + 세척 스테이션)

주요 응용 분야

MicroCal PEAQ-ITC 기기는 다양한 응용 분야에서 가치를 제공하며, 그중 일부는 아래와 같습니다.

생물학적 시스템의 결합 친화도 측정

ITC는 생물학적 상호작용의 친화도와 화학양론을 매우 정확하게 측정하는 데 이상적입니다. 상호작용하는 분자의 표지나 고정화가 필요하지 않으며 분자 질량 제한이 없습니다. ITC는 단백질, 핵산, 항체, 탄수화물, 지질, ATP, 저해제 및 의약 화합물 등 다양한 생물학적 상호작용 연구에 사용되어 왔습니다.

작용 기전

리간드는 어디에 결합하는가? 활성 부위인가? 알로스테릭 부위인가? 다른 리간드 및 보조인자와 비교했을 때 경쟁적, 비경쟁적 또는 불경쟁적인가? 결합이 협력적인가?

ITC는 이러한 결합 및 상호작용 메커니즘에 대한 중요한 통찰을 제공합니다.

효소 동역학

효소를 분석하기 위한 간단한 실험 방법이 있는가? 실험 과정이 복잡한가? 기질을 변형하면 SAR 또는 기전 연구에 영향을 미치는가?

ITC는 모든 효소 반응을 연구하는 데 사용할 수 있으며, 나노그램에서 피코그램 수준의 적은 시료만 필요하며 표지 없이도 분석이 가능합니다.

임계 미셀 농도(CMC)

ITC는 계면활성제, 블록 공중합체, 계면활성 펩타이드 및 단백질, 아미노산 기반 계면활성제 및 아미노기 기능성 지질을 포함한 다양한 미셀 복합체의 CMC를 결정하는 데 광범위하게 사용됩니다.

사용자 매뉴얼

소프트웨어 다운로드

05 November 2021

1.41

Analysis Software

  •     Maintenance release
1.41

05 November 2021

1.41

Control Software

  •     Maintenance release
1.41

12 January 2021

1.40

Analysis Software

  •     Maintenance release
1.40

12 January 2021

1.40

Control Software

  •     Maintenance release
1.40

23 April 2020

1.30

Control Software

  •     Maintenance release
1.30

23 April 2020

1.30

Analysis Software

  •     Maintenance release
1.30

20 March 2019

1.22

Control software
  • Maintenance release
1.22

20 March 2019

1.22

Analysis software
  • Maintenance release
1.22

03 September 2018

1.21

Control software
  • Windows 10 compatibility
  • Maintenance release
  • Licensing requirement
  • Adaptive Filter Disabling
1.21

03 September 2018

1.21

Analysis software
  • Windows 10 compatibility
  • Maintenance release
  • Licensing requirement
  • Adaptive Filter Disabling
1.21

17 April 2015

1.0

MicroCal ITC Origin Analysis software Dissociation model update
1.0

21 February 2018

1.0

MicroCal Concat ITC software
  • Initial release
1.0

지원팀

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연례 PM/PV 테스트
아니요
전화 / 이메일 지원
아니요
우선 지원
아니요
긴급 고장 방문*
아니요
부품 포함
아니요
아니요
기술 및 소프트웨어 지원
IQ/OQ(제약)***

*인건비 및 출장비 포함***추가 비용으로 이용 가능

결합 친화도 및 화학량론 측정을 위한 "골드 스탠다드"

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