Visão geral
A Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC) é uma ferramenta analítica poderosa para caracterizar a estabilidade térmica de proteínas e outras biomoléculas. A técnica mede a entalpia (ΔH) e a temperatura (Tm) de transições estruturais termicamente induzidas das moléculas em solução. Essas informações fornecem visões valiosas sobre os fatores que estabilizam ou desestabilizam as proteínas, os ácidos nucleicos, os complexos micelares e outros sistemas macromoleculares. Os dados são usados para prever a vida útil de produtos biomoleculares, incluindo produtos biofarmacêuticos, permitir comparações lote a lote e entre moléculas inovadoras e biossimilares, desenvolver estratégias de purificação, caracterizar e avaliar construções de proteínas e classificar as afinidades dos ligantes a seus alvos proteicos em programas de descoberta de medicamentos de pequenas moléculas.
O sistema MicroCal PEAQ-DSC de alta sensibilidade apresenta análise de dados automatizada para permitir a geração de dados de estabilidade térmica de alta integridade e oferece conformidade com as normas regulamentares, permitindo simultaneamente uma fácil integração com os sistemas de manuseio e transferência de dados existentes. Operação autônoma do instrumento após o carregamento das amostras libera o tempo do operador. Este sistema completo não requer acessórios adicionais, reagentes ou produtos consumíveis.
Principais características
- Técnica de indicação da estabilidade padrão-ouro que exige pouco desenvolvimento de ensaio.
- Medição direta e livre de marcação da estabilidade biomolecular em estado nativo em soluções.
- Medição de constantes de ligação muito próximas de até 1020M-1.
- Sistema manual com pipeta e dispositivo de limpeza.
- O poderoso software MicroCal PEAQ-DSC reduz o tempo de análises de dados típicas e inclui:
- PEAQ-Compliance: o sistema está disponível com o Malvern Access Controller (MAC) para limitar o acesso aos POPs definidos pelo usuário e recursos de análise de dados. Os dados podem ser exibidos usando o Gerador de relatórios, com detalhes do usuário e a capacidade de utilizar assinaturas eletrônicas para facilitar a integração do fluxo de trabalho ao sistema de qualidade da sua empresa e contribuir para a conformidade com as normas 21 CFR, Parte 11 e Anexo 11. Isso é fornecido como um acessório opcional.
- PEAQ-Performance: detecta e valida automaticamente a prontidão do sistema para obter o desempenho ideal.
- PEAQ-Smart (incluindo o PEAQ-Finder): para operações e análises de dados baseadas em POP. Fornece novos algoritmos para detectar até mesmo picos sutis e “ombros”, facilitando a identificação automática e não-subjetiva de várias transições, como aquelas vistas em proteínas de vários domínios.
- PEAQ-Compare: para a comparação quantitativa de traços DSC em estudos de comparabilidade, sendo ideal para estudos de biossimilaridade e de lote a lote.
- Pronto para a rede: as atualizações são enviadas por e-mail durante as análises para mantê-lo informado sobre o andamento do ensaio.
O MicroCal PEAQ-DSC Automatizado também está disponível com amostrador automático.
Como funciona
As estruturas funcionais formadas pelas proteínas e por outras macromoléculas suportam as mudanças conformacionais induzidas por temperatura, como o desdobramento. Essas mudanças resultam na absorção do calor como resultado da redistribuição de ligações não covalentes na molécula. Os Calorímetros de Varredura Diferencial medem essa absorção de calor com bastante precisão.
O núcleo térmico do sistema MicroCal PEAQ-DSC contém uma célula de amostra (contendo a amostra de interesse) e uma célula de referência (contendo uma solução tampão correspondente), ambas armazenadas em uma camisa de isolamento. Essas duas células são sempre mantidas à mesma temperatura e, durante uma medição, elas são aquecidas a uma velocidade de varredura constante.
Conforme a molécula dentro da célula de amostra se desdobra, o calor é absorvido, criando uma diferença de temperatura (ΔT) entre a célula de amostra e a célula de referência. Isso resulta em um gradiente térmico em todas as unidades Peltier, criando uma tensão proporcional que, por sua vez, é convertida em energia para formar um loop de feedback nas unidades Peltier, a fim de retornar o valor de ΔT para zero.
Como o desdobramento de proteínas é um evento endotérmico, ele é observado como um deslocamento positivo no termograma. O ponto médio da transição de fusão desta proteína é a Tm e a área sob a curva é a entalpia (ΔH) do processo de desdobramento (veja a figura abaixo).
A análise de dados e os parâmetros medidos/derivados são descritos mais detalhadamente na página sobre a tecnologia de Calorimetria de Varredura Diferencial.
Especificação
Geral
Tecnologia | Calorimetria de Varredura Diferencial |
---|---|
Tipo de medição |
Ponto médio de temperatura (TM)
Entalpia (ΔH)
Alteração da capacidade de aquecimento (ΔCp)
|
Célula
Célula | Capilar |
---|---|
Material da célula | Tântalo |
Volume da célula | 130 μL |
Amostra
Volume da amostra | 250 µL (enchimento manual) |
---|---|
Concentração típica de amostra | 0,01 mg/mL – 10 mg/mL 1 |
processamento de amostra | ≤6 amostras analisadas/8h |
Sistema
Ruído | 0,05 μCal/°C 2 |
---|---|
Repetibilidade da linha de base | 1 μCal/°C 2 |
Tempo de resposta | 5s 2 |
Repetibilidade | <0,2 µCal/°C 3 |
Reprodutibilidade | <0,08°C pad. Dev. TM e <2% RSD em ΔH 4 |
Reprodutibilidade do sistema | <0,1°C pad. Dev. TM e <5% RSD em ΔH 4 |
Modos de feedback múltiplos | Sim (passivo, ganho alto, ganho baixo) |
Faixa de temperatura | 2°C a 130°C 2,5 |
Velocidade de varredura máxima | 240°C/h |
Varredura reversa | Sim |
Calorimetria de transtorno de pressão (PPC) | N/A - dispositivo de limpeza manual com fluxos orientados |
Solventes de limpeza | Água e detergente (Contrad 90) usado como padrão |
Software
21 CFR parte 11 | Sim, com a opção de software PEAQ-Compliance |
---|---|
Rede pronta | Sim, com capacidade de alerta por e-mail |
Ambiente operacional
Temperatura operacional (°C) | +10°C a +28°C |
---|---|
Temperatura de armazenamento | -20°C a +50°C |
Umidade | 10% a 70%, sem condensação (10% a 90% para armazenamento) |
Classificação de proteção de entrada (IP) | IP21 |
Potência | 100-240 V A/C, 50/60 Hz, 70 W (célula), PC conforme fornecido |
Certificação | CE (EN61010-1), EMC (EN61326-2-1, EN61326-1, FCC, ICES, VCCI), ISO9001:2008 |
Peso e dimensões
Dimensões (L, P, A) | 20 cm x 44 cm x 19 cm |
---|---|
Peso | 8,2 kg |
Observações
1 Depende da amostra. 2 Resultados típicos para ribonuclease (RNase) em tampão 50 mM KAc com pH 5,5 a 60°C/h com alto retorno 3 Novas varreduras de um tampão estável 4 Usando ribonuclease (RNase) 5 O intervalo pode ser estendido para -10°C mediante solicitação |
Suporte
Proteja seu investimento e garanta estar sempre com a melhor performance com os planos de serviço da Malvern Panalytical.
Ao comprar um produto Malvern Panalytical, entendemos que esta é apenas a primeira etapa de uma relação profissional que durará por toda a vida útil do instrumento. A Malvern Panalytical oferece suporte ao seu negócio de acordo com suas necessidades.
Serviço de apoio ao usuário
- Suporte por telefone e e-mail.
- Operadores que assumem a responsabilidade pela sua chamada e garantem resposta à consulta.
Treinamento
- Eventos de treinamento de usuários
Descargas de software
Opções de serviço da Malvern Panalytical - escolha o plano certo para você:
Plano Platinum da Malvern Panalytical
Para laboratórios onde ter o instrumento operacional é um fator crítico para sua performance diária. Atendimento com alta prioridade. É o plano “tudo incluso” que evita as contas inesperadas de reparos imprevistos.
Plano Gold da Malvern Panalytical
Melhore a produtividade de seu laboratório mantendo a eficiência do seu instrumento. Atendimento com prioridade combinado com o suporte de especialistas técnicos e de software, garantindo a performance de seu instrumento.
Visita Bronze da Malvern Panalytical
Para laboratórios que buscam otimizar a performance dos instrumentos com visitas regulares para manutenção preventiva.
Plano Platinum | Plano Gold | Visita Bronze | |
---|---|---|---|
Teste Anual de PM/PV | Sim | Sim | Não |
Telefone / Email do Suporte | Sim | Sim | Não |
Atendimento Prioritário | Sim | Sim | Não |
Visitas de Emergências* | Sim | Sim | Não |
Inclui peças | Sim | Não | Não |
Suporte Técnico e Software | Sim | Sim | Sim |
IQ/OQ (Farma)*** | Sim | Sim | Sim |
*inclui diárias & gastos de viagem***disponível por um custo adicional