特點與優勢
MicroCal PEAQ-ITC Automated 結合了 MicroCal PEAQ-ITC 系統高靈敏度的熱分析儀核心，以及量測過程無須額外人為操作的自動化功能，可滿足忙碌研究和藥物開發實驗室對於生產力的需求，這套系統可直接測量生物化學結合過程中釋放或吸收的熱量，並由此計算結合親和力 (KD)、化學計量 (n)、焓 (ΔH) 和熵 (ΔS)，除了製備適當濃度的樣品和試劑外，只需最低程度的檢定開發，即可迅速獲得初步結果，軟體操作也相當簡單，其包含了最佳化自動指令碼，可穩定操作和量測各種樣品類型和條件。
- 人性化使用者介面可協助您輕鬆設定實驗參數。
- 單次實驗即可取得所有結合參數 (親和力、化學計量、焓和熵)
- 只需最低程度的檢定開發即可迅速獲得初步結果，無須進行標記、固定化，且沒有分子量限制
- 高訊雜比讓您對得到的數據品質，以及所產生之親和力與熱力學參數的相關性更有信心
- 從 sub-millimolar 到 picomolar 範圍間提供優良的解離常數 (10-2 至 10-12 M) 數據品質
- 硬幣形狀的測試槽可讓樣品混合最佳化
- 無反應性的赫史特合金 (Hastelloy) 提供化學耐受性及生物樣品相容性
- 高靈敏度，甚至可使用低至 10 µg 的蛋白質樣品研究任何生化交互作用
- 樣品置於可溫控的 96 孔槽盤。
- 全自動化系統，量測過程無須額外人為操作，可增強生產力
MicroCal PEAQ-ITC Analysis 軟體提供實驗設計模擬、大型數據集的批量評估、數據品質自動化評估和流暢的使用者介面，可引導使用者迅速且輕鬆地獲得最終數據和具備簡報品質的圖表。
- 在單一工作階段中開啟多個實驗
- 支援多種自動化擬合模型
- 解離
- 酶動力學 - 多次注射
- 酶動力學 - 單次注射
- 單組結合位點
- 序列結合位點
- 單組結合位點 - 模擬
- 兩組結合位點
- 結合競爭性
- 自動化評估數據品質
- 數據品質良好 - 結合
- 數據品質良好 - 未結合
- 數據品質不佳 - 檢查數據。
運作原理
等溫滴定熱分析儀可測量兩個分子交互作用時發生的熱量變化，由於交互作用的分子從自由狀態變成結合狀態時，非共價鍵會重新分配和形成，因此會釋放或吸收熱量，ITC 可以監控這些熱量的變化，方法是當結合配對物種混合時，其會利用外加功率的方式使參考槽和樣品槽一直維持在相等溫度，藉由測量給予槽池的功率差異，就可以知道作用發生時的熱量變化，參考槽通常含有水，樣品槽則含有其中一種結合配對物種 (樣品，通常是高分子，但並非一定)，而攪拌注射器則會含有另一種結合配對物種 (配體)，接著，配體會被注射到樣品槽中，通常為 0.5 到 2 μL 等分，直到配體濃度達到樣品的二倍到三倍為止，每次注射配體都會產生熱脈衝，將該脈衝對時間積分並對濃度正規化，以產生 kcal/mol 對莫耳比率 (配體/樣品) 的滴定曲線。所得出的等溫線將依據結合模型進行擬合，以產生親和力 (KD)、化學計量 (n) 及交互作用中的焓 (ΔH) 等資訊。
規格
| 测量类型 | 親和力 (KD) |
|---|---|
| 测量类型 | 焓 ∆H |
| 测量类型 | 熵 ∆S |
| 测量类型 | 化學計量 (n) |
| 样品容量 | 384 (四個 96 孔槽盤) |
| 样品盘温度范围 | 在環境溫度下，4 °C ± 2 °C |
| 样品量 | 370 µL |
| 样品池容积 | 200 µL |
| 进样针体积 | 40 µL |
| 进样体积精度 | 2 µL 時 < 1% |
| 通量 | 最高每 24 小時 42 次 (模擬) |
| 样品池材料 | 赫史特合金 |
| 样品池 | 硬幣形狀 |
| 噪音 | 0.15 ncal/s |
| 温度范围 | 2 °C 至 80 °C |
| 温度稳定性 | ±0.00012 °C |
| 响应时间 | 8 s* |
| 多重反馈模式 | 有 (被動式、高增益、低增益) |
| 注解 | *MicroCal PEAQ-ITC 儀器反應時間是實際的時間常數， 其為第一次偏離基線以及峰值點等於最大峰值高度 63% 時兩者之間的時間間隔。 |
操作環境
| 温度（可控） | 10 °C 至 28 °C |
|---|---|
| 濕度 | 0% 至 70% RH，無冷凝 |
電力額定功率
| 电源 | 100 - 240 V，50/60 Hz，400 W |
|---|---|
| 重量 | 91 kg |
| 尺寸 （宽, 长, 高）： | 63 x 58 x 77 cm |
技術支援
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軟體下載
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對於期望優化儀器效能、定期預防性維護至關重要。
| Platinum Plan | Gold Plan | Bronze Visit | |
|---|---|---|---|
| 年度 PM/PV 測試 | 有 | 有 | 無 |
| 電話/e-mail 支援 | 有 | 有 | 無 |
| 優先回應 | 有 | 有 | 無 |
| 緊急故障叫修* | 有 | 有 | 無 |
| 包含零件 | 有 | 無 | 無 |
| 軟體和技術支援 | 有 | 有 | 有 |
| IQ/OQ (製藥業)*** | 有 | 有 | 有 |
*包含維修和差旅費用 ***需支付額外費用
主要功能
MicroCal PEAQ-ITC 儀器可為各種應用提供助益，部分概述如下：
藥物開發 (活性化合物驗證、先導化合物最佳化和 SAR)
活性化合物驗證和先導化合物最佳化的計畫核心是獲得準確的親和力測量及化學計量結果，由於 ITC 不需要標記或固定化，對於質量的上下限或緩衝劑並無特殊要求，且能提供非常精確地親和力數據，因此被普遍應用於測定任何蛋白質和藥物的交互作用，包括小分子和生物製劑。
網路研討會：Sprint Bioscience on label-free fragment screening
白皮書：Addressing the needs of drug discovery with the MicroCal PEAQ-ITC instruments
結構生物學
ITC 是結構生物學家工具庫中的關鍵要素，不僅適用於結構活性的定量量測，也適用於共結晶條件的最佳化。
應用說明：Microcalorimetry as a tool for structural biology
網路研討會：Co-crystal structure optimization using Isothermal Titration Calorimetry
