Use of the new MicroCal PEAQ-ITC system for measurement and characterization of a broad range of protein-LMW compound interactions
白皮書
概述
MicroCal PEAQ-ITC 设计特点是易于使用和极其灵敏。 更广的亲和力范围，能够分析亲和力从弱到强的结合力，具有优异的可重复性。Microcal PEAQ-ITC分析软件提供了实验设计模拟、大型数据集批量评估和自动化数据质量评定，对照实验自动设定，具有简化的用户界面，能够引导用户轻松快捷地查看最终数据和演示高质置图形。
- 全新软件界面、附有视频操作维护教程，让任何用户都能够生成高质量的数据。
- 高信噪比可让用户获取的数据质量、生成亲和力的相关性及热力学相关参数更加可靠。
- 使用清洁剂对样品池和滴定注射器进行自动清洗，保证仪器始终处于最佳性能，有助于生成高质量的可重现数据。
- 只需一次实验，测定所有结合参数：亲和力 (KD)、化学结合计量比 (n)、焓变 (ΔH) 和熵变 (ΔS)。
- 无需分析开发过程，即可快速获得初步结果，无标签、无固定化且无分子量限制。
- 仅用 10µg 蛋白质即可对生物分子的相互作用进行分析。
- 直接测量毫摩到纳摩级亲和力 (KDS)（102 至 10-9 M）。
- 采用竞争性结合技术测量纳摩到皮摩尔解离常数（10-9 至 10-12M）。
- 非反应性镍基合金具有耐化学性，与各种生物样品相容。
- 与非水溶剂相容。
- 可升级至全自动的 MicroCal PEAQ-ITC Automated。
MicroCal PEAQ-ITC 可用于多种应用，包括表征小分子、蛋白质、抗体、核酸、脂质和其他生物分子的分子间相互作用。 它也可用于进行酶动力学测量。
分析軟體
MicroCal PEAQ-ITC 分析软件可以提供实验设计模拟、大规模数据集的批量评估、数据质量的自动评估，同时提供简化的用户界面以引导用户轻松快速地获得最终数据和演示级质量的图像。
- 在单个会话中打开多个实验
- 支持许多自动化的拟合模型
- 自动评估数据质量
工作原理
马尔文帕纳科等温滴定微量热仪测定分子相互作用过程中吸收或放出热量。相互作用的分子从自由态变为结合态时，非共价键的断裂和形成会导致热量发生变化。
参照池通常加入纯水，样品池加入待研究对象中的一种(一般为大分子，如蛋白质)，而滴定器里则装有另一种研究对象(配体分子，如化合物)。在实验过程中，配体被可控地滴入样品池中(同时伴随充分混合)，一般为0.5到2μL,直到样品池中的配体浓度2-3倍过量于样品池中的蛋白浓度。每次滴定会产生一个热量脉冲，通过对每一滴热量的积分并对浓度进行归一化处理后生成摩尔放热量（kcal/mol）对摩尔比率(配体/样品）作图，再选择拟合合适的结合模型（Binding Models），获取结合相关的亲和力 (KD)、化学结合计量比 (n)、焓变 (ΔH) 和熵变 (ΔS)。
