Constante de associação

Ao analisar a cinética de ligação com alguns biossensores, como o WAVEsystem, uma tecnologia Creoptix, uma molécula será imobilizada na superfície do biossensor (o chip) e será denominada "ligante". A segunda molécula passa em um fluxo microfluídico e é chamada de "analito". 

Imagem à direita: A curva resultante de uma medição de interação de ligação (um sensorgrama).

Primeiro, a linha de base é estabelecida com o fluxo do tampão passando pelo sensor com um ligante imobilizado. Depois disso, a amostra (substância a ser analisada, analito) passa pelo fluxo. O analito está associado ao ligante durante a fase de associação. A partir daí, a constante de associação pode ser calculada, como a taxa na qual o analito se liga ao ligante para formar um complexo na concentração padrão. É por isso que ela é expressa em moles por segundo.  

Juntas, a taxa de associação e a taxa de dissociação (k_d) definem a afinidade (constante de dissociação de equilíbrio, K_D) e determinam a cinética de ligação (a interação dinâmica entre duas moléculas). A K_D é calculada como k_d/k_a e determina a concentração de analito na qual metade dos ligantes é ocupada pelo analito em equilíbrio.

A medição precisa e eficiente das interações intermoleculares e dos eventos de ligação é um elemento essencial de uma ampla variedade de pesquisas básicas e um componente indispensável dos programas de descoberta de medicamentos. 

O WAVEsystem é um biossensor óptico que pode medir a constante de associação à medida que mede a cinética de ligação.

Além do WAVEsystem, que usa interferometria acoplada à grade (GCI), os métodos comuns para medir a constante de associação são a interferometria de biocamada (BLI) ou a ressonância plasmônica de superfície (SPR). 

Em nossa página de comparação de tecnologias, você pode saber mais sobre os recursos da BLI em comparação com a SPR e a GCI.