Constante de dissociação

O gráfico abaixo mostra os resultados da medição de uma interação de ligação. Primeiro, a linha de base é estabelecida com o fluxo do tampão passando pelo sensor com um ligante imobilizado. Depois disso, a amostra (substância a ser analisada, analito) passa pelo fluxo. O analito se associa ao analito durante a fase de associação, a partir da qual a constante de associação pode ser calculada. A mudança do fluxo da amostra de volta para o buffer inicia a fase de dissociação.

Duas interações podem ter a mesma afinidade (K_D), mas cinética muito diferente (k_a e k_d).  

No exemplo abaixo, a interação representada pela linha azul tem associação e dissociação rápidas, enquanto a interação representada pela linha vermelha tem uma associação substancialmente mais lenta e uma dissociação muito mais lenta. 

Isso resulta na mesma proporção de k_d/k_a e, portanto, na mesma afinidade (K_D).

Exemplo de duas interações com a mesma afinidade (K_D), mas cinética diferente (k_a e k_d)

Isso significa que a medição da afinidade, por si só, muitas vezes não é suficiente para determinar quais compostos provavelmente valerão a pena ser desenvolvidos em um medicamento.  É provável que um pesquisador esteja procurando uma interação rápida até a saturação entre o medicamento e o alvo, como na interação representada pela linha azul.

Na farmacologia e, especificamente, na descoberta de medicamentos, a taxa de dissociação é um parâmetro importante para determinar o potencial de um medicamento: o tempo que um medicamento permanece no complexo (ou seja, medicamento com alvo do medicamento) influencia seu efeito no alvo, ou seja, a eficácia do medicamento.  Dessa forma, no início da descoberta de medicamentos, os possíveis medicamentos são frequentemente examinados e classificados de acordo com sua taxa de inatividade. A taxa de dissociação (k_d) ou a taxa de desligamento (k_off) pode ser medida com um biossensor.

O WAVEsystem é um biossensor óptico que pode medir a constante de dissociação à medida que mede a cinética de ligação. Sua alta sensibilidade, combinada com sua compatibilidade com amostras brutas e o método waveRAPID® que permite maior rendimento, torna o WAVEdelta muito adequado para triagem fora da taxa.