NanoSight Pro를 이용한 바이러스 벡터 안정성 및 보관 평가

소개 

제형 개발의 주된 목적 중 하나는 우수한 제품 안정성과 함께 높은 역가를 달성하는 것입니다. 그러나 기존 생물학적 분석법을 사용한 역가 분석은 어렵고 시간이 많이 소요됩니다. 이 응용 노트에서는 나노 입자 추적 분석(NTA) 기술을 활용하여 빠른 측정 기능과 최소한의 샘플 전처리 기능을 갖춘 NanoSight Pro가 시간 경과에 따른 제형 안정성을 어떻게 효과적으로 평가하는지를 보여 줍니다.

렌티바이러스 취약점

이 연구에서는 NanoSight Pro를 사용하여 렌티바이러스* 제형의 안정성을 분석한 것을 보여줍니다. 렌티바이러스 샘플은 NTA 분석을 위한 최적의 농도로 PBS 완충액에 희석했으며, 488nm 레이저가 장착된 NanoSight Pro로 분석했습니다. NanoSight Pro는 신속한 크기 및 농도 측정을 제공하여 5분 이내에 프로세스를 완료합니다. 

렌티바이러스 제형은 생산 직후(그림 1 - 파란색 선), -80°C 보관에서 해동한 후(주황색 선), 실온에서 3시간 후(보라색 선)에 측정했습니다(그림 1). 시간과 보관 조건 모두 바이러스 벡터 역가에 큰 영향을 미쳤는데, -80°C 보관 시에는 30%, 실온에서 3시간 후에는 57% 감소했습니다(표 1). -80°C에서 보관하면 벡터 응집이 발생하여 200nm보다 큰 입자 수가 증가하여 NanoSight Pro 이미지에서 명확하게 확인할 수 있습니다(그림 2 보라색 프레임의 삽입물 및 표 1). 실온에 노출시키면 렌티바이러스가 온도에 의해 불안정해지는 것이 확인되었습니다. 이는 NanoSight Pro 이미지에서 명확하게 확인할 수 있습니다(그림 2 주황색 프레임의 삽입물 및 표 1). 

그림 1: 렌티바이러스 안정성에 대한 보관 조건의 영향 표시

표 1: 렌티바이러스 샘플의 크기 및 농도(역가) 요약: 신선한 제형, 실온에서 3시간 보관 후, -80°C에서 보관 후

결론 

NanoSight Pro는 바이러스 벡터 크기 및 역가를 빠르게 스크리닝할 수 있는 강력한 도구로, 몇 분 내에 제형 안정성과 보관 조건의 영향에 대한 실시간 인사이트를 제공합니다. 

더 보기 

이 응용 노트는 5개 파트로 구성된 시리즈의 일부입니다. 이 주제에 대해 더 깊이 이해하고 싶다면 나머지 시리즈를 살펴보십시오. 

• NanoSight Pro를 사용한 빠른 바이러스 벡터 순도 평가 
• NanoSight F-NTA로 바이러스 벡터 식별
• NanoSight F-NTA로 VSV-G 양성 렌티바이러스 식별

주요 제품 및 관련 제품

*렌티바이러스 샘플과 제형 완충액은 Malvern Panalytical의 공동 연구자 중 한 명에 의해 친절하게 제공되었습니다.