概要
最も過激なサンプルの測定
この革新的な流路系設計では、すべてのマイクロ流体を(デバイスコア内ではなく)使い捨てカートリッジに統合し、チップの近くにマイクロバルブを配置する代わりに、大口径標準バルブが装置の下流に配置されています。
マイクロ流体と光学式バイオセンサーを単一のディスポーザブルカートリッジに組み合わせることで、WAVEsystemは、通常プレートベースの分析でしか得られない粗サンプルの堅牢性を実現します。適合するサンプルタイプには、100%血清または血漿、細胞ライセート、粗膜調製、大規模な薬剤ターゲット、ウイルス様粒子(VLP)、リポソームおよび凝集体(フィブリル)などがあります。これらは詰まりのリスクを伴いません。
また、このカートリッジは、フラグメントライブラリに代表される高濃度のDMSO、アセトニトリルなどの有機溶媒や、粘性の高い洗浄剤にも対応しており、膜タンパク質の可溶化および精製条件を検討することが可能です。カートリッジは自己完結型で使い捨てであるため、クロスコンタミネーションを排除して、サンプルを保護し、信頼性の高いデータを確保します。
高速転移用のマイクロバルブはありません
カートリッジ設計により、150 msecの超高速転移時間が実現され、10 sec-1(69msの半減期)のオフレートを確実に測定できるため、弱い結合フラグメントのカイネティクス研究が可能になります。
粗サンプルの目詰まりなし
非凝固マイクロ流体は、さまざまなサンプルタイプに対応して、活性と生物学的コンテキストを維持し、他のシステムではオフラインになる有害な精製手順や詰まりから時間を節約します。
特許取得済みのグレーティング結合干渉法(GCI)技術と非凝固マイクロ流体を組み合わせることで、Creoptix® WAVEsystemは最も困難なサンプルタイプからでも高品質のデータを提供し、他のラベルフリー定量化と比較してより優れた信号および時間の分解能を実現します。ラベルフリーリガンド固定化は、通常、自然発生アミン(-NH2)、チオール(-SH2)、アルデヒド(-COOH)の各グループを介してリガンドを生体センサーに結合するか、あるいは生体センサー表面に結合した抗体にリガンドを結合することで実現されます。サンプルを自然な構成と生理学的条件で維持することで、タンパク質の不活性化や変性のリスクを低減し、生成された生データにカイネティクス活性が忠実に描写されるようにします。
WAVEchipの互換性
WAVEchip sensor | Sensor surface matrix | Immobilization modality | Suggested applications |
---|---|---|---|
PCP | Quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
PCP-STA | Pre-immobilized streptavidin
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
PCP-RST | Regenerable streptavidin surface
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, ligand screening |
PCP-PAG | Pre-immobilized fusion protein A/G
Quasi-planar PC hydrogel |
IgG | For capturing the broadest range of IgG and FC-tagged proteins |
PCP-NTA | Pre-immobilized NTA
Quasi-planar PC hydrogel |
His-Tag | Large His-tagged ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
PCP-LIP | Pre-immobilized lipophilic groups
Quasi-planar PC hydrogel |
Lipid | Hydrophobic (large) ligands such as liposomes, membrane vesicles |
PCZ | Functionalized with a zwitterionic polymer bearing carboxylic acids and tertiary amines in similar densities, quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Low fouling, ideal for coupling proteins with low isoelectric points or polyanionic ligands |
PCL | Low capacity, thick PC hydrogel with a lower amount of negative charges (approx. 25%) | Amine coupling | Complex matrices such as serum, culture supernatant. Requires sulfo-NHS for activation |
PCH | Thick PC hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
PCH-NTA | Pre-immobilized NTA
Thick PC hydrogel |
His-Tag | His-tagged ligands, general purpose |
PCH-STA | Pre-immobilized streptavidin
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
PCH-RST | Regenerable streptavidin surface
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, ligand screening |
DXP | Quasi-planar DX hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
DXH-STA |
Pre-immobilized streptavidin
Thick DX hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
DXH | Thick DX hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
PC- = polycarboxylate, DX- = Carboxymethyldextran.
DX coated sensors available upon request |
FAQ(よくあるご質問)
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- WAVEchips®と互換性のあるものは何ですか?
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- 100%の血清、血漿、および細胞上清
- アセトニトリルやDMSOを高率に含む非従来型溶媒
- 膜タンパク質を可溶化するための粘性洗浄剤および添加剤
- 細胞膜調整、部分的に可溶化された未精製の材料
- ウイルス様粒子(VLP)、リポソーム、またはナノディスクは、可溶化構造として使用
- 大規模な結合パートナー:ナノ粒子と粗膜調整
- WAVEchipsはどのくらいの頻度で使用できますか?
- これは、WAVEchip®の型式、使用する固定化方法、および固定化リガンドの特性によって異なります。たとえば、Ni-NTA表面に捕獲されたHisタグ付きリガンドタンパク質はEDTAで再生可能で、リガンドを新鮮な状態で何度も再キャプチャできます。つまり、このようなチップがCreoptix®WAVEsystemに挿入されていれば、通常は繰り返し使用できます。Ni-NTAチップとタンパク質A/Gチップの両方で再生が可能で、複数の用途に対応していますが、ストレプトアビジンや他のチップでは容易に再生できません。
- チップに固定できるリガンドの量はどのくらいですか?
- 固定容量は、チップの種類と固定方法によって異なります。Creoptix® WAVEシステム製品群の中で最大容量のチップである4PCH WAVEchipは、最大35,000 pg/mm2のBSAを固定化できますが、実験容量は使用するリガンドによって異なります。WAVEcontrolソフトウェアには、許容可能な理論的応答に必要なリガンド密度を決定するのに役立つシミュレータが組み込まれています。