低固定程度下的高靈敏度分析，無質量傳輸上的限制

摘要

在分子交互作用的無標記分析期間，質量傳輸限制代表在一級動力學上有顯著的來源偏差。源於大量溶液及表面之間的分析物濃度梯度，質量傳輸限制會在高密度配體固定程度下特別明顯，往往需要產生可量測的鍵結訊號。

運用專有的光柵耦合干涉 (GCI) 技術，相較於傳統表面電漿共振 (SPR) 方法，Creoptix WAVE 更能提供優異的靈敏度，特別是在低活性蛋白質的低配體固定程度之下。這代表即使反應非常小，也能產生可靠的動力學 (R_max <1)。

透過使用不同酵素固定密度來進行 Acetazolamide 和碳酸酐酶 II 之間的交互作用特性分析，我們展示了 Creoptix WAVE 可大幅減少樣品消耗，同時避免質量傳輸限制。

表 1：Acetazolamide 鍵結至不同碳酸酐酶 II (CAII) 密度的動力學數據

圖例：(A) 感應圖顯示在低和高固定密度下，Acetazolamide (分析物，MW 222.25 Da) 和碳酸酐酶 II (CAII，配體 MW 29 kDa) 之間的交互作用。CAII 在不同固定密度下於 4PCH WAVEchip 上擷取，如圖所示。記錄 Acetazolamide 在每個固定程度下的劑量反應曲線。使用質量傳輸限制 (MTL) 模型來擬合高固定程度 (左) 的數據，因在使用 Creoptix WAVEcontrol 軟體下交互作用會自 1:1 模型 (右) 偏離。(B) 資料顯示低固定程度下符合的動力學並不受限於質量傳輸，而是遵循一級動力學。

圖 1：Acetazolamide 鍵結至不同碳酸酐酶 II (CAII) 密度