WAVEsystem
Instruments de bioanalyse de nouvelle génération pour la découverte de médi...
La constante d'association est un paramètre cinétique utilisé lors de la mesure des interactions intermoléculaires et des événements de liaison entre deux molécules ou plus. La constante de vitesse d'association (ka, kon ou taux d'association) correspond à la vitesse à laquelle une molécule se lie à une autre pour former un complexe. Elle est exprimée en moles (quantification standard du nombre de molécules) par seconde : M-1 s-1.
Comment mesurer la constante d'association ?
Lors de l'analyse de la cinétique de liaison à l'aide de certains biocapteurs, tels que le WAVEsystem, une technologie Creoptix, une molécule est immobilisée à la surface du biocapteur (la puce) et est appelée le « ligand ». La deuxième molécule, appelée l'« analyte », s'écoule dans un flux microfluidique.
Image droite : Courbe résultant de la mesure d'une interaction de liaison (appelée « sensorgramme »).
Dans un premier temps, la ligne de base est établie en laissant s'écouler le tampon devant le capteur avec un ligand immobilisé. L'échantillon (analyte) s'écoule ensuite. L'analyte est associé au ligand pendant la phase d'association. La constante d'association peut alors être calculée, comme la vitesse à laquelle l'analyte se lie au ligand pour former un complexe à la concentration standard. C'est pourquoi elle est exprimée en moles par seconde.
Ensemble, le taux d'association et le taux de dissociation (kd) définissent l'affinité (constante de dissociation à l'équilibre, KD) et déterminent la cinétique de liaison (c'est-à-dire, l'interaction dynamique entre deux molécules). La constante KD est calculée par la formule kd/ka et détermine la concentration d'analyte à laquelle la moitié des ligands sont occupés par l'analyte à l'équilibre.
Comment mesurer les constantes d'association à l'aide du WAVEsystem ?
La mesure précise et efficace des interactions intermoléculaires et des événements de liaison est un élément essentiel d'une grande variété de recherches fondamentales et une composante indispensable des programmes de découverte de médicaments.
Le WAVEsystem est un biocapteur optique qui mesure la constante d'association pendant qu'il mesure la cinétique de liaison.
| Spécification | WAVE | WAVEdelta |
|---|---|---|
| Const. d'association Plage |
ka = 103 – 5 x 107 M-1 s–1 (petites molécules)
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ka = 103 – 5 x 107 M-1 s–1 (petites molécules)
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Quelles autres méthodes puis-je utiliser pour mesurer la constante d'association ?
Comparaison entre l'interférométrie biocouche (BLI), la résonance plasmonique de surface (SPR) et l'interférométrie couplée à un réseau (GCI)
Outre le WAVEsystem, qui utilise l'interférométrie couplée à un réseau (GCI), les méthodes courantes pour mesurer la constante d'association sont l'interférométrie biocouche (BLI) ou la résonance plasmonique de surface (SPR).
Consultez notre page de comparaison des technologies BLI, SPR et GCI pour découvrir leurs caractéristiques.
