La constante de disociación es un parámetro cinético utilizado para medir las interacciones intermoleculares y los eventos de unión entre dos o más moléculas. Mientras que la tasa de asociación (ka) describe la velocidad a la que una molécula se une a la otra para formar un complejo, la tasa de disociación (kd) describe la velocidad a la que el complejo se descompone, expresada con la unidad s-1. En conjunto, estos parámetros determinan la constante de disociación de equilibrio o afinidad de unión (KD).
¿Cómo se miden las constantes de disociación?
En el siguiente gráfico, se muestran los resultados de medir una interacción de unión. En primer lugar, la línea de base se establece pasando la solución amortiguadora más allá del sensor con un ligando inmovilizado. Después de esto, la muestra (analito) fluye más allá. El analito se asocia con el analito durante la fase de asociación, a partir de la cual se puede calcular la constante de asociación. El cambio del flujo desde la muestra de regreso a la solución amortiguadora inicia la fase de disociación.
La curva resultante de una medición de interacción de unión (un sensograma).
¿Qué tan importante es medir la constante de disociación?
Dos interacciones pueden tener la misma afinidad (KD), pero cinética muy diferente (ka y kd).
En el siguiente ejemplo, la interacción representada por la línea azul tiene una asociación rápida y una disociación rápida, mientras que la interacción representada por la línea roja tiene una asociación sustancialmente más lenta y una disociación mucho más lenta.
Esto da como resultado la misma relación de kd/ka y, por lo tanto, la misma afinidad (KD).
Ejemplo de dos interacciones con la misma afinidad (KD), pero con cinética diferente (ka y kd)
Esto significa que, a menudo, medir la afinidad por sí sola no es suficiente para determinar qué compuestos probablemente vale la pena seguir desarrollando en un fármaco. Puede que un investigador esté buscando una interacción rápida a la saturación entre el fármaco y el objetivo, como en la interacción representada por la línea azul.
¿Por qué la constante de disociación es relevante en el desarrollo de fármacos?
En la farmacología, y específicamente en el descubrimiento de fármacos, la tasa de disociación es un parámetro importante para determinar el potencial de un fármaco: el tiempo que un fármaco permanece en el complejo (es decir, fármaco con objetivo de fármaco) influye en su efecto sobre el objetivo, es decir, la eficacia del fármaco. Por lo tanto, en el descubrimiento temprano de medicamentos, los fármacos potenciales a menudo se criban y clasifican según su tasa de disociación. La tasa de disociación (kd), o la tasa de desvinculación (koff), se puede medir con un biosensor.
El sistema WAVEsystem es un biosensor óptico que puede medir la constante de disociación mientras mide la cinética de unión. Su alta sensibilidad, combinada con su compatibilidad con las muestras crudas y el método de waveRAPID® que permite un mayor rendimiento, hace que WAVEdelta sea muy adecuado para el cribado de la tasa de disociación.
