Vectores lentivirales

Zetasizer Advance Ultra utiliza tecnologías de dispersión de luz dinámica (DLS, del inglés “Dynamic Light Scattering”) y de dispersión de luz dinámica de ángulo múltiple (MADLS, del inglés “Multi-Angle Dynamic Light Scattering”). Sus funciones clave para la caracterización de vectores lentivirales son las siguientes:

• Medición de tamaño: La DLS mide el tamaño de las partículas de lentivirus con base en la dispersión de la luz, ya que las partículas se someten a un movimiento browniano. Proporciona evaluaciones rápidas y exactas del tamaño y la polidispersidad promedio de las partículas.
• Valoración vírica: La MADLS mejora la exactitud de la medición del tamaño y puede determinar la concentración de partículas, lo que contribuye a realizar cálculos precisos de la concentración del lentivirus.
• Potencial zeta: Zetasizer Advance Ultra evalúa el potencial seta de los vectores virales, lo que indica su carga superficial y estabilidad en suspensión, y es vital para predecir la vida útil y el comportamiento in vivo.
• Alta sensibilidad: Zetasizer Advance Ultra puede detectar un amplio rango de tamaños de partículas con alta sensibilidad, lo que lo hace adecuado para varias etapas de fabricación y desarrollo de lentivirus.

Con la información detallada sobre el tamaño y la estabilidad de las partículas, Zetasizer Advance Ultra ayuda a optimizar las formulaciones de vectores lentivirales para garantizar un rendimiento uniforme y predecir con exactitud la estabilidad de la formulación.

NanoSight Pro utiliza la tecnología de análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA, del inglés “Nanoparticle Tracking Analysis”), respaldada por un software avanzado, para caracterizar las nanopartículas en una suspensión líquida. Sus características clave en la caracterización del vector lentiviral incluyen lo siguiente:

• Medición de tamaño: Mediante el seguimiento del movimiento browniano de partículas individuales, NanoSight Pro determina con precisión la distribución del tamaño de los lentivirus. Este análisis detallado del tamaño, junto con la confirmación visual directa, cumple una función esencial en la optimización del desarrollo de la formulación de lentivirus y proporciona información valiosa sobre la estabilidad y la pureza de la muestra.
• Determinación de la concentración (valoración): NanoSight Pro proporciona recuentos precisos partícula por partícula de partículas virales, lo que permite a los investigadores calcular directamente la concentración de lentivirus. Esto garantiza procesos de producción robustos y una dosificación coherente tanto en aplicaciones de investigación como terapéuticas.
• Detección de agregación: NanoSight Pro puede visualizar, identificar y cuantificar los agregados de partículas lentivirales. La agregación puede afectar la eficiencia de la transducción y desencadenar respuestas inmunitarias, lo que es esencial para el control de calidad en la fabricación de lentivirus.
• Capacidad de fluorescencia: Con la detección por fluorescencia, el instrumento puede diferenciar entre partículas etiquetadas y no etiquetadas, lo que mejora la especificidad en muestras complejas. Esto es crucial para comprender cómo los vectores lentivirales interactuarán con los sistemas biológicos.

Con una visualización en tiempo real y un análisis de alta resolución, NanoSight Pro permite a los investigadores obtener una comprensión integral de sus muestras de vectores lentivirales.

La combinación de las capacidades de NanoSight Pro y Zetasizer Advance Ultra puede ofrecer un enfoque más completo para la caracterización de vectores de lentivirus:

Característica	NanoSight Pro	Zetasizer Advance Ultra
Medición	Tamaño de partículas, valoración vírica y polidispersidad	Tamaño de partículas, valoración vírica, polidispersidad y potencial zeta
Tecnología	Análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA)	Dispersión de luz dinámica (DLS) y DLS multiángulo (MADLS)
Rango de tamaño	De 30 a 1000 nm	De <1 nm a 10 μm
Rango de concentración	De 107 a 109 partículas/ml	De 108 a 1013 partículas/ml
Medición de tamaño	Proporciona distribución del tamaño partícula por partícula con alta resolución	Medición rápida y precisa del diámetro hidrodinámico
Manipulación de la polidispersidad	Se destaca con muestras polidispersas y entrega una confirmación visual inmediata	Ideal para muestras monodispersas o ligeramente polidispersas
Potencial zeta	No disponible	Mide el potencial zeta para la carga superficial y la evaluación de estabilidad
Capacidad de fluorescencia	Disponible para diferenciar las partículas etiquetadas con características específicas	No disponible
Visualización	Visualización en tiempo real de las partículas y los comportamientos	No disponible
Salida de datos	Distribuciones de tamaño basadas en números	Distribuciones de tamaño ponderadas en intensidad
Preparación de la muestra	Preparación mínima de la muestra, conservación de la integridad	Se requiere una preparación mínima y no destructiva de la muestra
Aplicaciones ideales	Análisis detallado de muestras polidispersas y diluidas	Caracterización rápida de nanopartículas pequeñas monodispersas

En algunos casos, NanoSight Pro puede ser más adecuado cuando se requiere una caracterización detallada de las partículas, como durante las etapas iniciales del desarrollo de la formulación del vector lentiviral, cuando se investigan problemas de agregación o cuando se emplea la fluorescencia para observar la subpoblación de muestra específica. El uso de Zetasizer Advance Ultra se recomienda para el control de calidad de rutina, los estudios de estabilidad y cuando se necesita información sobre el potencial zeta. 

Con el aprovechamiento de las fortalezas de ambos instrumentos, los investigadores pueden obtener una comprensión más exhaustiva de los vectores lentivirales, lo que conduce a una mejor eficacia y seguridad en aplicaciones de genoterapia.