Visão geral
Meça as amostras mais difíceis
O inovador design fluídico integra todos os microfluídicos no cartucho descartável (não no núcleo do dispositivo) e insere válvulas padrão de diâmetro grande no fluxo posterior do instrumento, em vez de microválvulas próximas ao chip.
Ao combinar os microfluídicos e o biossensor óptico em um único cartucho descartável, o sistema WAVEsystem oferece robustez de amostras brutas normalmente obtida apenas com ensaios baseados em placa. Os tipos de amostra compatíveis incluem 100% de soro ou plasma, lisados celulares, preparações de membranas brutas, alvos de medicamentos grandes, partículas semelhantes a vírus (VLPs), lipossomas e agregados (fibrilas) sem risco de entupimento.
O cartucho quimicamente seguro também é adaptável para trabalhar com altas concentrações de DMSO, acetonitrilo e outros solventes orgânicos típicos de bibliotecas de fragmentos, além de detergentes viscosos que permitem a exploração de condições de solubilização e purificação para proteínas de membrana. Por serem independentes e descartáveis, os cartuchos eliminam a contaminação cruzada, protegendo suas amostras e garantindo dados mais confiáveis.
Sem microválvulas para rápidas transições
O design do cartucho permite tempos de transição ultrarrápidos de 150 ms para proporcionar uma determinação confiável de taxas de dissociação de 10 s–1 (meia vida de 69 ms), viabilizando o estudo cinético de fragmentos com ligações precárias.
Sem entupimento nas amostras brutas
Os microfluídicos sem entupimento acomodam uma ampla variedade de tipos de amostras para preservar a atividade e o contexto biológico, o que poupa tempo nas etapas de purificação prejudiciais e entupimento responsáveis por colocar outros sistemas fora de funcionamento.
Ao combinar a tecnologia patenteada de Interferometria acoplada a grade (GCI) com microfluídicos sem entupimento, o WAVEsystem da Creoptix® disponibiliza dados de alta qualidade até mesmo dos tipos de amostra mais desafiadores e alcança uma resolução superior em sinal e tempo se comparado com outras formas de quantificação sem marcadores. A imobilização de ligadura sem marcadores é normalmente obtida por meio do acoplamento covalente do ligante ao biossensor via grupos de amina natural (-NH2), tiol (-SH2) ou aldeído (-COOH) ou por meio da conexão de um ligante a um anticorpo que se conectou de maneira covalente à superfície do biossensor. A manutenção de amostras em configuração nativa e condições fisiológicas reduz o risco de inativação ou desnaturação de proteínas, garantindo que os dados brutos gerados sejam uma representação fiel da atividade cinética.
Compatibilidade com WAVEchip
WAVEchip sensor | Sensor surface matrix | Immobilization modality | Suggested applications |
---|---|---|---|
PCP | Quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
PCP-STA | Pre-immobilized streptavidin
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
PCP-RST | Regenerable streptavidin surface
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, ligand screening |
PCP-PAG | Pre-immobilized fusion protein A/G
Quasi-planar PC hydrogel |
IgG | For capturing the broadest range of IgG and FC-tagged proteins |
PCP-NTA | Pre-immobilized NTA
Quasi-planar PC hydrogel |
His-Tag | Large His-tagged ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
PCP-LIP | Pre-immobilized lipophilic groups
Quasi-planar PC hydrogel |
Lipid | Hydrophobic (large) ligands such as liposomes, membrane vesicles |
PCZ | Functionalized with a zwitterionic polymer bearing carboxylic acids and tertiary amines in similar densities, quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Low fouling, ideal for coupling proteins with low isoelectric points or polyanionic ligands |
PCL | Low capacity, thick PC hydrogel with a lower amount of negative charges (approx. 25%) | Amine coupling | Complex matrices such as serum, culture supernatant. Requires sulfo-NHS for activation |
PCH | Thick PC hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
PCH-NTA | Pre-immobilized NTA
Thick PC hydrogel |
His-Tag | His-tagged ligands, general purpose |
PCH-STA | Pre-immobilized streptavidin
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
PCH-RST | Regenerable streptavidin surface
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, ligand screening |
DXP | Quasi-planar DX hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
DXH-STA |
Pre-immobilized streptavidin
Thick DX hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
DXH | Thick DX hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
PC- = polycarboxylate, DX- = Carboxymethyldextran.
DX coated sensors available upon request |
Perguntas frequentes
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- Com o que os WAVEchips® são compatíveis?
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- Cem por cento de sobrenadante de soro, plasma e células
- Solventes não tradicionais, inclusive altas porcentagens de acetonitrilo e DMSO
- Aditivos e detergentes viscosos para solubilizar proteínas de membrana
- Preparações de membranas celulares, material parcialmente solubilizado e não purificado
- Partículas semelhantes a vírus (VLPs), lipossomas ou nanodiscos usados como estruturas de solubilização
- Grandes parceiros de ligação: nanopartículas e preparações de membranas brutas
- Com que frequência posso usar os WAVEchips?
- Isso depende do tipo de WAVEchip®, do método de imobilização usado e do comportamento do ligante imobilizado. Por exemplo, as proteínas ligantes marcadas por His e capturadas em uma superfície Ni-NTA podem ser regeneradas por EDTA e pelo ligante recém-recapturado várias vezes. Isso significa que esse chip geralmente pode ser usado repetidas vezes, desde que permaneça inserido no WAVEsystem da Creoptix®. As regenerações são possíveis com chips Ni-NTA e de proteína A/G, permitindo usos múltiplos, porém isso não é facilmente realizado com estreptavidina ou outros chips.
- Quanto ligante você pode imobilizar nos chips?
- A capacidade de imobilização depende do tipo de chip e do método de imobilização. O chip de maior capacidade no portfólio do WAVEsystem da Creoptix®, o WAVEchip 4PCH, pode imobilizar até 35.000 pg/mm2 de BSA, mas a capacidade experimental depende do ligante exato usado. O software WAVEcontrol contém um simulador integrado que ajuda a determinar a densidade do ligante necessária para uma resposta teórica aceitável.