O Guia de cinética | Cinética de ligação com o sistema WAVE. Download now

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WAVEchip

Chip do sensor microfluídico sem entupimento para todas as necessidades

O design inovador do nosso cartucho microfluídico patenteado é compatível com amostras brutas, amostras patogênicas, solventes fortes e partículas grandes de até 1.000 nm, normalmente obtidas apenas com ensaios baseados em placa. Os WAVEchips foram projetados exclusivamente para o WAVEsystem.

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Visão geral

Meça as amostras mais difíceis

O inovador design fluídico integra todos os microfluídicos no cartucho descartável (não no núcleo do dispositivo) e insere válvulas padrão de diâmetro grande no fluxo posterior do instrumento, em vez de microválvulas próximas ao chip. 

Ao combinar os microfluídicos e o biossensor óptico em um único cartucho descartável, o sistema WAVEsystem oferece robustez de amostras brutas normalmente obtida apenas com ensaios baseados em placa. Os tipos de amostra compatíveis incluem 100% de soro ou plasma, lisados celulares, preparações de membranas brutas, alvos de medicamentos grandes, partículas semelhantes a vírus (VLPs), lipossomas e agregados (fibrilas) sem risco de entupimento.

O cartucho quimicamente seguro também é adaptável para trabalhar com altas concentrações de DMSO, acetonitrilo e outros solventes orgânicos típicos de bibliotecas de fragmentos, além de detergentes viscosos que permitem a exploração de condições de solubilização e purificação para proteínas de membrana. Por serem independentes e descartáveis, os cartuchos eliminam a contaminação cruzada, protegendo suas amostras e garantindo dados mais confiáveis.

Sem microválvulas para rápidas transições

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O design do cartucho permite tempos de transição ultrarrápidos de 150 ms para proporcionar uma determinação confiável de taxas de dissociação de 10 s–1 (meia vida de 69 ms), viabilizando o estudo cinético de fragmentos com ligações precárias.

Sem entupimento nas amostras brutas

Os microfluídicos sem entupimento acomodam uma ampla variedade de tipos de amostras para preservar a atividade e o contexto biológico, o que poupa tempo nas etapas de purificação prejudiciais e entupimento responsáveis por colocar outros sistemas fora de funcionamento.

Ao combinar a tecnologia patenteada de Interferometria acoplada a grade (GCI) com microfluídicos sem entupimento, o WAVEsystem da Creoptix® disponibiliza dados de alta qualidade até mesmo dos tipos de amostra mais desafiadores e alcança uma resolução superior em sinal e tempo se comparado com outras formas de quantificação sem marcadores. A imobilização de ligadura sem marcadores é normalmente obtida por meio do acoplamento covalente do ligante ao biossensor via grupos de amina natural (-NH2), tiol (-SH2) ou aldeído (-COOH) ou por meio da conexão de um ligante a um anticorpo que se conectou de maneira covalente à superfície do biossensor. A manutenção de amostras em configuração nativa e condições fisiológicas reduz o risco de inativação ou desnaturação de proteínas, garantindo que os dados brutos gerados sejam uma representação fiel da atividade cinética. 

Compatibilidade com WAVEchip

 
WAVEchip sensor Sensor surface matrix Immobilization modality Suggested applications
PCP Quasi-planar PC hydrogel Amine coupling Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs
PCP-STA Pre-immobilized streptavidin
Quasi-planar PC hydrogel
Biotin Large biotinylated ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs
PCP-RST Regenerable streptavidin surface
Quasi-planar PC hydrogel
Biotin Large biotinylated ligands, ligand screening
PCP-PAG Pre-immobilized fusion protein A/G
Quasi-planar PC hydrogel
IgG For capturing the broadest range of IgG and FC-tagged proteins
PCP-NTA Pre-immobilized NTA
Quasi-planar PC hydrogel
His-Tag Large His-tagged ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs
PCP-LIP Pre-immobilized lipophilic groups
Quasi-planar PC hydrogel
Lipid Hydrophobic (large) ligands such as liposomes, membrane vesicles
PCZ Functionalized with a zwitterionic polymer bearing carboxylic acids and tertiary amines in similar densities, quasi-planar PC hydrogel Amine coupling Low fouling, ideal for coupling proteins with low isoelectric points or polyanionic ligands
PCL Low capacity, thick PC hydrogel with a lower amount of negative charges (approx. 25%) Amine coupling Complex matrices such as serum, culture supernatant. Requires sulfo-NHS for activation
PCH Thick PC hydrogel Amine coupling Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose
PCH-NTA Pre-immobilized NTA
Thick PC hydrogel
His-Tag His-tagged ligands, general purpose
PCH-STA Pre-immobilized streptavidin
Thick hydrogel
Biotin Biotinylated ligands, general purpose
PCH-RST Regenerable streptavidin surface
Thick hydrogel
Biotin Biotinylated ligands, ligand screening
DXP Quasi-planar DX hydrogel Amine coupling Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs
DXH-STA Pre-immobilized streptavidin
Thick DX hydrogel
Biotin Biotinylated ligands, general purpose
DXH Thick DX hydrogel Amine coupling Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose
PC- = polycarboxylate, DX- = Carboxymethyldextran.
DX coated sensors available upon request

Perguntas frequentes

Com o que os WAVEchips® são compatíveis?
  • Cem por cento de sobrenadante de soro, plasma e células
  • Solventes não tradicionais, inclusive altas porcentagens de acetonitrilo e DMSO
  • Aditivos e detergentes viscosos para solubilizar proteínas de membrana
  • Preparações de membranas celulares, material parcialmente solubilizado e não purificado
  • Partículas semelhantes a vírus (VLPs), lipossomas ou nanodiscos usados como estruturas de solubilização
  • Grandes parceiros de ligação: nanopartículas e preparações de membranas brutas
Com que frequência posso usar os WAVEchips?
Isso depende do tipo de WAVEchip®, do método de imobilização usado e do comportamento do ligante imobilizado. Por exemplo, as proteínas ligantes marcadas por His e capturadas em uma superfície Ni-NTA podem ser regeneradas por EDTA e pelo ligante recém-recapturado várias vezes. Isso significa que esse chip geralmente pode ser usado repetidas vezes, desde que permaneça inserido no WAVEsystem da Creoptix®. As regenerações são possíveis com chips Ni-NTA e de proteína A/G, permitindo usos múltiplos, porém isso não é facilmente realizado com estreptavidina ou outros chips.
Quanto ligante você pode imobilizar nos chips?
A capacidade de imobilização depende do tipo de chip e do método de imobilização. O chip de maior capacidade no portfólio do WAVEsystem da Creoptix®, o WAVEchip 4PCH, pode imobilizar até 35.000 pg/mm2 de BSA, mas a capacidade experimental depende do ligante exato usado. O software WAVEcontrol contém um simulador integrado que ajuda a determinar a densidade do ligante necessária para uma resposta teórica aceitável.