As quinases de receptores repetidos ricas em leucina (LRR-RKs) são capazes de detectar pequenas moléculas, bem como ligantes de peptídeos ou proteínas. Muitos desses LRR-RKs dependem dos co-receptores da família SERK para a associação de ligantes e receptores de alta afinidade. Aqui, caracterizamos as interações de várias LRR-RKs com seus ligantes cognatos e co-receptores da família SERK usando um sensor biológico de superfície sem rótulo baseado em Interferometria acoplada a grade (GCI).
Essa nova técnica possibilita a análise de parceiros vinculativos, independentemente do seu respectivo peso molecular e com alta sensibilidade. Devido à quantidade comparativamente baixa de proteína recombinante e analito necessário, a GCI é uma excelente alternativa para experimentos em que os principais componentes são escassos.
Demonstramos que os ectodomínios de LRR isolados do receptor se ligam aos seus respectivos ligantes com afinidades de ligação consideravelmente diferentes, enquanto os co-receptores da família SERK se ligam aos receptores associados ao ligante com cinética semelhante. Esses estudos de interação apontam as contribuições relativas do receptor, ligante e co-receptor para a formação e ativação de unidades de sinalização ativa. Prevemos que a GCI seja uma ferramenta poderosa para ajudar a identificar novos pares receptor-ligante, bem como outros co-receptores no futuro.
As quinases de receptores repetidos ricas em leucina (LRR-RKs) são capazes de detectar pequenas moléculas, bem como ligantes de peptídeos ou proteínas. Muitos desses LRR-RKs dependem dos co-receptores da família SERK para a associação de ligantes e receptores de alta afinidade. Aqui, caracterizamos as interações de várias LRR-RKs com seus ligantes cognatos e co-receptores da família SERK usando um sensor biológico de superfície sem rótulo baseado em Interferometria acoplada a grade (GCI).
Essa nova técnica possibilita a análise de parceiros vinculativos, independentemente do seu respectivo peso molecular e com alta sensibilidade. Devido à quantidade comparativamente baixa de proteína recombinante e analito necessário, a GCI é uma excelente alternativa para experimentos em que os principais componentes são escassos.
Demonstramos que os ectodomínios de LRR isolados do receptor se ligam aos seus respectivos ligantes com afinidades de ligação consideravelmente diferentes, enquanto os co-receptores da família SERK se ligam aos receptores associados ao ligante com cinética semelhante. Esses estudos de interação apontam as contribuições relativas do receptor, ligante e co-receptor para a formação e ativação de unidades de sinalização ativa. Prevemos que a GCI seja uma ferramenta poderosa para ajudar a identificar novos pares receptor-ligante, bem como outros co-receptores no futuro.
