A reprodução de plantas depende do crescimento altamente regulado do tubo de pólen para a entrega de esperma. Esse processo é controlado por peptídeos de sinalização RALF secretados, que anteriormente mostraram ser percebidos por receptor-quinase de membrana Catharanthus roseus tipo RLK1 (CrRLK1Ls)/complexos de PROTEÍNAS ANCORADAS EM GLICOSILFOSFATIDILINOSITOL (GPI) (LGG) ou por proteínas extensinas (LRXs) de repetição ricas em leucina (LRR).
Aqui, demonstramos que os peptídeos RALF se desdobram em proteínas bioativas e dissulfeto estabilizados por ligação que ligam o domínio LRR de proteínas LRX com baixa afinidade nanomolar. As estruturas de cristal dos complexos LRX2–RALF4 e LRX8–RALF4 com resolução de 3,2 e 3,9 Å, respectivamente, revelam um arranjo dimérico de proteínas LRX, com cada monômero ligando um peptídeo RALF dobrado. Mutações baseadas em estruturas direcionadas à interface do complexo LRX–RALF4, ou à dobra RALF4, reduzem a ligação RALF4 à função LRX8 in vitro e RALF4 em tubos de pólen em crescimento. Mutantes que visam a interface do dímero LRX estabilizada de ligação de dissulfeto não conseguem resgatar fenótipos de infertilidade lrx. Ensaios bioquímicos quantitativos revelam que o RALF4 liga os módulos de parede celular LGSs e LRX com afinidades de ligação significativamente diferentes e com modos de ligação distintos e mutuamente exclusivos.
Nossas análises bioquímicas, estruturais e genéticas revelam uma rede de sinalização complexa pela qual ligantes RALF instruem diferentes proteínas de sinalização usando mecanismos distintos de direcionamento.
A reprodução de plantas depende do crescimento altamente regulado do tubo de pólen para a entrega de esperma. Esse processo é controlado por peptídeos de sinalização RALF secretados, que anteriormente mostraram ser percebidos por receptor-quinase de membrana Catharanthus roseus tipo RLK1 (CrRLK1Ls)/complexos de PROTEÍNAS ANCORADAS EM GLICOSILFOSFATIDILINOSITOL (GPI) (LGG) ou por proteínas extensinas (LRXs) de repetição ricas em leucina (LRR).
Aqui, demonstramos que os peptídeos RALF se desdobram em proteínas bioativas e dissulfeto estabilizados por ligação que ligam o domínio LRR de proteínas LRX com baixa afinidade nanomolar. As estruturas de cristal dos complexos LRX2–RALF4 e LRX8–RALF4 com resolução de 3,2 e 3,9 Å, respectivamente, revelam um arranjo dimérico de proteínas LRX, com cada monômero ligando um peptídeo RALF dobrado. Mutações baseadas em estruturas direcionadas à interface do complexo LRX–RALF4, ou à dobra RALF4, reduzem a ligação RALF4 à função LRX8 in vitro e RALF4 em tubos de pólen em crescimento. Mutantes que visam a interface do dímero LRX estabilizada de ligação de dissulfeto não conseguem resgatar fenótipos de infertilidade lrx. Ensaios bioquímicos quantitativos revelam que o RALF4 liga os módulos de parede celular LGSs e LRX com afinidades de ligação significativamente diferentes e com modos de ligação distintos e mutuamente exclusivos.
Nossas análises bioquímicas, estruturais e genéticas revelam uma rede de sinalização complexa pela qual ligantes RALF instruem diferentes proteínas de sinalização usando mecanismos distintos de direcionamento.
