La reproducción de las plantas depende del crecimiento altamente regulado del tubo polínico para la entrega de esperma. Este proceso es controlado por péptidos de señalización RALF secretados, que se demostró previamente que son percibidos por los complejos de quinasas receptoras de membrana de tipo Catharanthus roseus RLK1 (CrRLK1L) o PROTEÍNAS ANCLADAS A GLICOSILFOSFATIDILINOSITOL (GPI) de tipo LORELEI (LLG), o por las proteínas de repetición ricas en leucina (LRR) extensinas (LRX).
Aquí demostramos que los péptidos RALF se integran a las proteínas bioactivas estabilizadas con enlaces disulfuro que se unen al dominio LRR de las proteínas LRX con baja afinidad nanomolar. Las estructuras cristalinas de los complejos de LRX2–RALF4 y LRX8–RALF4 con una resolución de 3,2 y 3,9 Å, respectivamente, revelan una disposición dimérica de las proteínas LRX. Cada monómero se une a un péptido RALF integrado. Las mutaciones basadas en la estructura dirigidas a la interfaz compleja LRX–RALF4, o el RALF4 integrado, reducen la unión de RALF4 a LRX8 in vitro y la función de RALF4 en los tubos polínicos en crecimiento. Los mutantes dirigidos a la interfaz del dímero LRX estabilizado de enlace disulfuro no pueden rescatar a los fenotipos de infertilidad lrx. Los ensayos bioquímicos cuantitativos revelan que el RALF4 se une a los módulos de pared celular LLG y LRX con afinidades de unión muy diferentes y con modos de unión distintos y mutuamente excluyentes.
Nuestros análisis bioquímicos, estructurales y genéticos revelan una compleja red de señalización mediante la cual los ligandos RALF instruyen a diferentes proteínas de señalización con distintos mecanismos de focalización.
La reproducción de las plantas depende del crecimiento altamente regulado del tubo polínico para la entrega de esperma. Este proceso es controlado por péptidos de señalización RALF secretados, que se demostró previamente que son percibidos por los complejos de quinasas receptoras de membrana de tipo Catharanthus roseus RLK1 (CrRLK1L) o PROTEÍNAS ANCLADAS A GLICOSILFOSFATIDILINOSITOL (GPI) de tipo LORELEI (LLG), o por las proteínas de repetición ricas en leucina (LRR) extensinas (LRX).
Aquí demostramos que los péptidos RALF se integran a las proteínas bioactivas estabilizadas con enlaces disulfuro que se unen al dominio LRR de las proteínas LRX con baja afinidad nanomolar. Las estructuras cristalinas de los complejos de LRX2–RALF4 y LRX8–RALF4 con una resolución de 3,2 y 3,9 Å, respectivamente, revelan una disposición dimérica de las proteínas LRX. Cada monómero se une a un péptido RALF integrado. Las mutaciones basadas en la estructura dirigidas a la interfaz compleja LRX–RALF4, o el RALF4 integrado, reducen la unión de RALF4 a LRX8 in vitro y la función de RALF4 en los tubos polínicos en crecimiento. Los mutantes dirigidos a la interfaz del dímero LRX estabilizado de enlace disulfuro no pueden rescatar a los fenotipos de infertilidad lrx. Los ensayos bioquímicos cuantitativos revelan que el RALF4 se une a los módulos de pared celular LLG y LRX con afinidades de unión muy diferentes y con modos de unión distintos y mutuamente excluyentes.
Nuestros análisis bioquímicos, estructurales y genéticos revelan una compleja red de señalización mediante la cual los ligandos RALF instruyen a diferentes proteínas de señalización con distintos mecanismos de focalización.
