Guía de cinética: cinética de unión con el WAVEsystem

Todos los productos de Creoptix se han diseñado pensando en la experiencia del usuario. Al mismo tiempo, se trata de instrumentos bioanalíticos altamente sofisticados que requieren la intervención de un usuario experto. 

Para ayudarlo a sacar el máximo partido a su producto, hemos combinado la riqueza de nuestros conocimientos y experiencia internos en un manual de referencia práctico. Nuestros expertos lo guiarán a través de los principios más importantes en los que se basan las tecnologías, técnicas y aplicaciones. Proporcionamos información, consejos y sugerencias sobre el diseño experimental y el análisis de datos. En una sección de solución de problemas independiente, se cubren las situaciones y preguntas que nuestros equipos de Atención al Cliente suelen encontrar con más frecuencia.

Tanto si lo lee de principio a fin, como si lo consulta por preguntas específicas o lo guarda como un recordatorio práctico de ecuaciones y protocolos, esperamos que este manual lo ayude en su trabajo y contribuya a obtener resultados que aceleren el descubrimiento.

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¿Qué incluye la guía?
Contenido Página
1. Bienvenida 5
2. Introducción 7
2.1 Introducción al análisis de interacciones sin etiquetas 8
     2.1.1 Definiciones de terminología sin etiquetas 12
     2.1.2 Principios del análisis sin etiquetas 16
2.2 El WAVEsystem de Creoptix 19
     2.2.1 Tecnología GCI 19
     2.2.3 Microfluídicos sin obstrucción 21
     2.2.3 GCI frente a otras tecnologías de biosensores sin etiquetas 24
2.3 Descripción general de las aplicaciones 26
     2.3.1 Análisis de cinética y afinidad 26
     2.3.2 Cribado molecular 29
     2.3.3 Especificidad de unión 31
     2.3.4 Análisis de concentración 32
3. Diseño experimental 34
3.1 Superficies del sensor 35
     3.1.1 Selección del tipo de chip 35
     3.1.2 Acondicionamiento de chips 40
     3.1.3 Estrategias de inmovilización 41
     3.1.4 Regeneración de superficie 51
     3.1.5 Regeneración del ligando 53
3.2 Inmovilización del ligando 56
     3.2.1 Densidad del ligando 56
     3.2.2 Actividad del ligando 59
     3.2.3 Limitación del transporte de masa 60
     3.2.4 Avidez del ligando 61
     3.2.5 Unión no específica 62
3.3 Amortiguador 63
     3.3.1 Consideraciones generales 63
     3.3.2 Composición del amortiguador 63
     3.3.3 Comparación de amortiguador y muestra 67
3.4 Referencia y corrección 69
     3.4.1 Referencia 69
     3.4.2 Doble referencia 69
     3.4.3 Corrección de DMSO (corrección de solvente) 70
3.5 Formato de ensayo 75
     3.5.1 Análisis de cinética y afinidad 75
     3.5.2 Cribado molecular 84
     3.5.3 Especificidad de unión y experimentos de competencia 85
     3.5.4 Análisis de concentración 87
     3.5.5 Recuperación de muestras para la identificación de aglutinantes de analitos 91
4. Análisis de los datos 97
4.1 Ajuste de datos 98
     4.1.1 Saltos de señal 99
     4.1.2 Desviaciones 99
     4.1.3 Corrección de DMSO (corrección de solvente) 100
     4.1.4 Blancos 101
4.2 Evaluación de datos 102
     4.2.1 Resultados y calidad de la evaluación 103
     4.2.2 Ajustes y menú avanzado 105
     4.2.3 Selección del modelo 109
     4.2.4 Análisis de equilibrio 116
4.3 waveRAPID 117
4.4. Cribado 119
     4.4.1 Ajustes 119
     4.4.2 Gráfico de serie de datos 119
     4.4.3 Clasificación y aciertos 120
     4.4.4 Cribado fuera de rango 120
5. Solución de problemas 122
5.1 Fuga 123
5.2 Estado del dispositivo 123
5.3 Señal distorsionada 124
     5.3.1 Señal ruidosa 124
     5.3.2 Amplitudes inestables o bajas 125
     5.3.3 Señal de espículas o pérdidas de fase 126
5.4 Inmovilización del ligando 127
     5.4.1 Unión escasa 127
     5.4.2 Baja actividad del ligando 128
5.5 Cinética 128
     5.5.1 Sin señal sobreestequiométrica o de saturación 128
     5.5.2 Sin señal de disociación o asociación lineal 129
     5.5.3 waveRAPID 129
6. Referencias 130

Todos los productos de Creoptix se han diseñado pensando en la experiencia del usuario. Al mismo tiempo, se trata de instrumentos bioanalíticos altamente sofisticados que requieren la intervención de un usuario experto. 

Para ayudarlo a sacar el máximo partido a su producto, hemos combinado la riqueza de nuestros conocimientos y experiencia internos en un manual de referencia práctico. Nuestros expertos lo guiarán a través de los principios más importantes en los que se basan las tecnologías, técnicas y aplicaciones. Proporcionamos información, consejos y sugerencias sobre el diseño experimental y el análisis de datos. En una sección de solución de problemas independiente, se cubren las situaciones y preguntas que nuestros equipos de Atención al Cliente suelen encontrar con más frecuencia.

Tanto si lo lee de principio a fin, como si lo consulta por preguntas específicas o lo guarda como un recordatorio práctico de ecuaciones y protocolos, esperamos que este manual lo ayude en su trabajo y contribuya a obtener resultados que aceleren el descubrimiento.

[Creoptix kinetics guide.jpg] Creoptix kinetics guide.jpg

¿Qué incluye la guía?

Contenido Página
1. Bienvenida 5
2. Introducción 7
2.1 Introducción al análisis de interacciones sin etiquetas 8
     2.1.1 Definiciones de terminología sin etiquetas 12
     2.1.2 Principios del análisis sin etiquetas 16
2.2 El WAVEsystem de Creoptix 19
     2.2.1 Tecnología GCI 19
     2.2.3 Microfluídicos sin obstrucción 21
     2.2.3 GCI frente a otras tecnologías de biosensores sin etiquetas 24
2.3 Descripción general de las aplicaciones 26
     2.3.1 Análisis de cinética y afinidad 26
     2.3.2 Cribado molecular 29
     2.3.3 Especificidad de unión 31
     2.3.4 Análisis de concentración 32
3. Diseño experimental 34
3.1 Superficies del sensor 35
     3.1.1 Selección del tipo de chip 35
     3.1.2 Acondicionamiento de chips 40
     3.1.3 Estrategias de inmovilización 41
     3.1.4 Regeneración de superficie 51
     3.1.5 Regeneración del ligando 53
3.2 Inmovilización del ligando 56
     3.2.1 Densidad del ligando 56
     3.2.2 Actividad del ligando 59
     3.2.3 Limitación del transporte de masa 60
     3.2.4 Avidez del ligando 61
     3.2.5 Unión no específica 62
3.3 Amortiguador 63
     3.3.1 Consideraciones generales 63
     3.3.2 Composición del amortiguador 63
     3.3.3 Comparación de amortiguador y muestra 67
3.4 Referencia y corrección 69
     3.4.1 Referencia 69
     3.4.2 Doble referencia 69
     3.4.3 Corrección de DMSO (corrección de solvente) 70
3.5 Formato de ensayo 75
     3.5.1 Análisis de cinética y afinidad 75
     3.5.2 Cribado molecular 84
     3.5.3 Especificidad de unión y experimentos de competencia 85
     3.5.4 Análisis de concentración 87
     3.5.5 Recuperación de muestras para la identificación de aglutinantes de analitos 91
4. Análisis de los datos 97
4.1 Ajuste de datos 98
     4.1.1 Saltos de señal 99
     4.1.2 Desviaciones 99
     4.1.3 Corrección de DMSO (corrección de solvente) 100
     4.1.4 Blancos 101
4.2 Evaluación de datos 102
     4.2.1 Resultados y calidad de la evaluación 103
     4.2.2 Ajustes y menú avanzado 105
     4.2.3 Selección del modelo 109
     4.2.4 Análisis de equilibrio 116
4.3 waveRAPID 117
4.4. Cribado 119
     4.4.1 Ajustes 119
     4.4.2 Gráfico de serie de datos 119
     4.4.3 Clasificación y aciertos 120
     4.4.4 Cribado fuera de rango 120
5. Solución de problemas 122
5.1 Fuga 123
5.2 Estado del dispositivo 123
5.3 Señal distorsionada 124
     5.3.1 Señal ruidosa 124
     5.3.2 Amplitudes inestables o bajas 125
     5.3.3 Señal de espículas o pérdidas de fase 126
5.4 Inmovilización del ligando 127
     5.4.1 Unión escasa 127
     5.4.2 Baja actividad del ligando 128
5.5 Cinética 128
     5.5.1 Sin señal sobreestequiométrica o de saturación 128
     5.5.2 Sin señal de disociación o asociación lineal 129
     5.5.3 waveRAPID 129
6. Referencias 130

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