Présentation
Mesure des échantillons les plus complexes
La conception fluidique est innovante : tous les composants microfluidiques sont intégrés dans la cartouche jetable (et non dans le noyau du dispositif) et des valves standards de gros calibre sont placées en aval dans l'instrument plutôt que des microvalves à proximité de la puce.
En combinant composants microfluidiques et biocapteur optique dans une même cartouche jetable, le système WAVEsystem offre une robustesse quant aux échantillons bruts, normalement obtenue uniquement avec des tests sur plaque. Les types d'échantillons compatibles incluent le sérum ou le plasma à 100 %, les lysats cellulaires, les préparations de membranes brutes, les cibles médicamenteuses de grande taille, les particules pseudovirales (PPV), les liposomes et les agrégats (fibrilles) sans risque d'obstruction.
La cartouche compatible avec les composants chimiques permet également de travailler avec des concentrations élevées de DMSO, d'acétonitrile et d'autres solvants organiques typiques des bibliothèques de fragments, ainsi que des détergents visqueux permettant l'exploration des conditions de solubilisation et de purification des protéines membranaires. En outre, comme les cartouches sont autonomes et jetables, elles éliminent toute contamination croisée, protégeant ainsi vos échantillons et renforçant la fiabilité des données.
Pas de microvalves pour des transitions rapides
![[wave chip 1.png] wave chip 1.png](https://dam.malvernpanalytical.com/8bbd4c8c-6ca5-4e05-8186-ae6000b80268/wave%20chip%201_Original%20file.png)
De par sa conception, la cartouche permet des temps de transition ultra-rapides de 150 ms pour une détermination fiable des taux de dissociation de 10 s–1 (demi-vie de 69 ms), permettant ainsi l'étude cinétique de fragments à faible liaison.
Absence d'obstruction pour les échantillons bruts
Les composants microfluidiques sans obstruction prennent en charge un large éventail de types d'échantillons afin de préserver l'activité et le contexte biologique, ce qui permet de gagner du temps par rapport à d'autres systèmes que les étapes de purification pénalisantes et les obstructions préjudiciables mettent hors ligne.
En associant la technologie brevetée d'interférométrie couplée à un réseau (GCI) aux composants microfluidiques sans obstruction, le système Creoptix® WAVEsystem fournit des données de haute qualité, même à partir des types d'échantillons les plus complexes, et offre une résolution supérieure en termes de signal et de temps par rapport à d'autres formes de détection sans marquage. L'immobilisation d'un ligand sans marquage est généralement obtenue par couplage covalent du ligand au biocapteur via des groupes d'amines (-NH2), de thiols (-SH2), aldéhyde (-CHO) ou carboxylate (-COOH) présents naturellement ou par fixation du ligand à un anticorps qui a lui-même été lié de façon covalente à la surface du biocapteur. Le maintien des échantillons en configuration native et dans des conditions physiologiques réduit le risque d'inactivation ou de dénaturation des protéines, garantissant ainsi que les données brutes générées sont une représentation fidèle de l'activité cinétique.
Compatibilité des puces WAVEchip
| WAVEchip sensor | Sensor surface matrix | Immobilization modality | Suggested applications |
|---|---|---|---|
| PCP | Quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
| PCP-STA | Pre-immobilized streptavidin
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
| PCP-RST | Regenerable streptavidin surface
Quasi-planar PC hydrogel |
Biotin | Large biotinylated ligands, ligand screening |
| PCP-PAG | Pre-immobilized fusion protein A/G
Quasi-planar PC hydrogel |
IgG | For capturing the broadest range of IgG and FC-tagged proteins |
| PCP-NTA | Pre-immobilized NTA
Quasi-planar PC hydrogel |
His-Tag | Large His-tagged ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs |
| PCP-LIP | Pre-immobilized lipophilic groups
Quasi-planar PC hydrogel |
Lipid | Hydrophobic (large) ligands such as liposomes, membrane vesicles |
| PCZ | Functionalized with a zwitterionic polymer bearing carboxylic acids and tertiary amines in similar densities, quasi-planar PC hydrogel | Amine coupling | Low fouling, ideal for coupling proteins with low isoelectric points or polyanionic ligands |
| PCL | Low capacity, thick PC hydrogel with a lower amount of negative charges (approx. 25%) | Amine coupling | Complex matrices such as serum, culture supernatant. Requires sulfo-NHS for activation |
| PCH | Thick PC hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
| PCH-NTA | Pre-immobilized NTA
Thick PC hydrogel |
His-Tag | His-tagged ligands, general purpose |
| PCH-STA | Pre-immobilized streptavidin
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
| PCH-RST | Regenerable streptavidin surface
Thick hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, ligand screening |
| DXP | Quasi-planar DX hydrogel | Amine coupling | Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs |
| DXH-STA |
Pre-immobilized streptavidin
Thick DX hydrogel |
Biotin | Biotinylated ligands, general purpose |
| DXH | Thick DX hydrogel | Amine coupling | Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose |
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PC- = polycarboxylate, DX- = Carboxymethyldextran.
DX coated sensors available upon request |
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Questions fréquentes
-
- Avec quoi les puces WAVEchip® sont-elles compatibles ?
-
- Sérum, plasma et surnageant cellulaire à 100 %
- Solvants non traditionnels, y compris des pourcentages élevés d'acétonitrile et de DMSO
- Détergents visqueux et additifs pour solubiliser les protéines membranaires
- Préparations de membranes cellulaires, matériel partiellement solubilisé, non purifié
- Particules pseudovirales (PPV), liposomes ou nanodisques utilisés comme structures de solubilisation
- Partenaires de liaison de grande taille : nanoparticules et préparations de membranes brutes
- À quelle fréquence puis-je utiliser les puces WAVEchip ?
- Cela dépend du type de puce WAVEchip®, de la méthode d'immobilisation utilisée et du comportement du ligand immobilisé. Par exemple, les protéines de ligand marquées à l'histidine capturées sur une surface Ni-NTA peuvent être régénérées par de l'EDTA et le ligand fraîchement recapturé plusieurs fois. Cela signifie qu'une telle puce peut généralement être utilisée à plusieurs reprises, à condition qu'elle reste insérée dans le système Creoptix® WAVEsystem. Les régénérations sont possibles avec les puces Ni-NTA et à protéines A/G, ce qui permet des utilisations multiples. Cependant, ce n'est pas facile à réaliser avec la streptavidine ou d'autres puces.
- Quelle quantité de ligand peut-on immobiliser sur les puces ?
- La capacité d'immobilisation dépend du type de puce et de la méthode d'immobilisation. 4PCH WAVEchip, la puce de capacité la plus élevée du portefeuille Creoptix® WAVEsystem, peut immobiliser jusqu'à 35 000 pg/mm2 d'ASB, mais la capacité expérimentale dépend du ligand utilisé. Le logiciel WAVEcontrol est doté d'un simulateur intégré qui permet de déterminer la densité de ligand requise pour une réponse théorique acceptable.